台湾地区修订并实施食品中安赛蜜、糖精、甘素和甜蜜素的检验方法2013年3月4日，台湾地区“行政院”卫生署发布署授食字第 1021900281 号公告，修正“食品中调味剂的检验方法－醋磺内酯钾、糖精、甘精及环己基（代）磺酰胺酸的检验”全文2点，并自即日生效。如下：
1.适用范围：本检验方法适用于食品中醋磺内酯钾[z1] （acesulfame potassium） 、糖精（saccharin） 、甘精[z2] （dulcin）及环己基（代）磺酰胺酸[z3] （cyclamate） 甜味剂的检验。
2.检验方法：检体经萃取后，以高效液相层析仪（high performance liquid chromatograph, HPLC）分析醋磺内酯钾、糖精及甘精的方法；检体经萃取及衍生化后，以高效液相层析仪分析环己基（代）磺酰胺酸的方法。
 2.1.装置：
 2.1.1.高效液相层析仪：
 2.1.1.1.检出器：光二极管数组检出器（photodiode array detector）。
 2.1.1.2.层析管：
 2.1.1.2.1.Phenyl，5 μm ，内径 4.6 mm×15 cm，或同级品（分析醋磺内酯钾、糖精及甘精）。
 2.1.1.2.2.RP18，3.5 μm ，内径 4.6 mm×10 cm，或同级品（分析环己基（代）磺酰胺酸）。
 2.1.2.均质机（Homogenizer） 。
 2.1.3.振荡器（Shaker）。
 2.2.试药：乙醇、乙及正己烷均采用液相层析级；碳酸氢钠、磷酸（85％）、硫酸及 6％次氯酸钠溶液均采用试药特级；去离子水（比电阻于25℃可达 18 MΩ．cm 以上）；醋磺内酯钾、糖精、甘精及环己基（代）磺酰胺酸钠对照用标准品。
 2.3.器具及材料：
 2.3.1.抽气瓶：250 mL。
 2.3.2.布赫纳漏斗（Buchner funnel）：直径 8 cm 。
 2.3.3.离心管：15 mL 及 50 mL，PP材质。
 2.3.4.滤膜：孔径 0.45 μm ，Nylon 材质。
 2.3.5.容量瓶：50 mL、100 mL 及 1000 mL。
 2.4.试剂的调制：
 2.4.1.50％硫酸溶液：
取硫酸 500 mL 缓缓倒入预先冰冷的去离子水 400 mL 中，冷却后加去离子水使成 1000 mL。
 2.4.2.0.2％磷酸溶液：
取磷酸 2.3 mL 加去离子水使成 1000 mL。
 2.4.3.0.02％磷酸溶液：
以 0.2％磷酸溶液稀释 10 倍。
 2.4.4.5 ％碳酸氢钠溶液：
称取碳酸氢钠 5 g，以去离子水溶解使成100 mL。
 2.5.移动相溶液的调制：
 2.5.1.乙与 0.2％磷酸溶液以 12：88（v/v）的比例混匀，经滤膜过滤，取滤液，供作醋磺内酯钾、糖精及甘精分析的移动相溶液。
 2.5.2.乙与 0.02 ％磷酸溶液以 7：3（v/v）的比例混匀，经滤膜过滤，取滤液，供作环己基（代）磺酰胺酸分析的移动相溶液。
 2.6.标准溶液的配制：
 2.6.1.醋磺内酯钾、糖精及甘精标准溶液：
取醋磺内酯钾及糖精对照用标准品各约 500 mg ，精确称定，以去离子水溶解并定容至 100 mL ，冷藏贮存，供作标准原液。另取甘精对照用标准品约 500 mg ，精确称定，以乙醇溶解并定容至 100mL，冷藏贮存，供作标准原液。临用时各取适量标准原液混合，以去离子水稀释至 2～250 μg/mL，供作标准溶液。
 2.6.2.环己基（代）磺酰胺酸标准溶液：
取相当于含环己基（代）磺酰胺酸约 500 mg 的对照用标准品，精确称定，以去离子水溶解并定容至 100 mL ，冷藏贮存，供作标准原液。临用时取适量标准原液，以去离子水稀释至 2～250 μg/mL，供作标准溶液。
 2.7.衍生化标准溶液的调制：
取 2.6.2. 节不同浓度的标准溶液各 5 mL ，分别置于 50 mL离心管中，依序加入正己烷 5 mL 、6 ％次氯酸钠溶液 1 mL 及 50 ％硫酸溶液 1 mL ，振荡 1分钟，静置分层。取上层液 3 mL，置于 15mL离心管中，加入 5％碳酸氢钠溶液 5 mL ，振荡 1分钟，静置分层。取上层液以滤膜过滤，供作分析环己基（代）磺酰胺酸的衍生化标准溶液。
 2.8.检液的调制：
 2.8.1.萃取：
 2.8.1.1.固体检体
将检体细切后，取约 10 g ，精确称定，加入去离子水 30 mL，静置 10 分钟后，以均质机均质 1分钟。以布赫纳漏斗抽气过滤，再以去离子水 15 mL清洗均质杯残渣并过滤，合并滤液，以去离子水定容至 50 mL，经滤膜过滤，供作检液。
 2.8.1.2.液体检体
将检体混匀后，取约 10 g ，精确称定，以去离子水定容至 50mL，混匀后，经滤膜过滤，供作检液。
 2.8.2.衍生化：
取 2.8.1. 节的检液 5 mL ，置于 50 mL离心管中，依序加入正己烷 5 mL 、6 ％次氯酸钠溶液 1 mL 及 50 ％硫酸溶液 1 mL ，振荡 1分钟，静置分层。取上层液 3 mL ，置于 15 mL离心管中，加入 5％碳酸氢钠溶液 5 mL ，振荡 1分钟，静置分层。取上层液以滤膜过滤，供作分析环己基（代）磺酰胺酸的衍生化检液。
 2.9.鉴别试验及含量测定:
 2.9.1.醋磺内酯钾、糖精及甘精：
精确量取 2.8.1. 节的检液及 2.6.1. 节的标准溶液各 20 μL ，分别注入高效液相层析仪中，依下列条件进行液相层析，就检液与标准溶液所得波峰的滞留时间及吸收图谱比较鉴别之，并依下列计算式求出检体中醋磺内酯钾、糖精或甘精的含量（g/kg）：
                                              C×V
检体中醋磺内酯钾、糖精或甘精的含量（g/kg）＝────
 M×1000
C ：由标准曲线求得检液中醋磺内酯钾、糖精或甘精的浓度（μg/mL）
V ：检体经定容的体积（mL）
M ：取样分析检体的重量（g）
高效液相层析测定条件：
光二极管数组检出器：波长 230 nm 。
层析管：Phenyl，5 μm ，内径 4.6 mm×15 cm。
移动相溶液：依 2.5.1. 节所调制的溶液。
移动相流速：1.0 mL/min。
 2.9.2.环己基（代）磺酰胺酸：
精确量取 2.8.2. 节的衍生化检液及 2.7. 节的衍生化标准溶液各20 μL，分别注入高效液相层析仪中，依下列条件进行液相层析，就衍生化检液与衍生化标准溶液所得波峰的滞留时间及吸收图谱比较鉴别之，并依下列计算式求出检体中环己基（代）磺酰胺酸的含量（g/kg）：
                                           C×V
检体中环己基（代）磺酰胺酸的含量（g/kg）＝────
 M×1000
C ：由标准曲线求得检液中环己基（代）磺酰胺酸的浓度（μg/mL）
V ：检体经定容的体积（mL）
M ：取样分析检体的重量（g）
高效液相层析测定条件：
光二极管数组检出器：波长 314 nm 。
层析管：RP18，3.5 μm ，内径 4.6 mm×10 cm。
移动相溶液：依 2.5.2. 节所调制的溶液。
移动相流速：1.0 mL/min。
 附注：1.本检验方法的定量极限醋磺内酯钾、糖精、甘精及环己基（代）磺酰胺酸均为 0.01 g/kg。
2.食品中有影响检验结果的物质时，应自行探讨。
来源：http://www.lawbank.com.tw/news/NewsContent.aspx?AID=10&NID=109143.00&kw=&TY=19&sd=&ed=&total=43625&NCLID=&lsid=
 
厦门WTO工作站编
2013.3.6
 [z1]安赛蜜
 [z2]甘素
 [z3]甜蜜素